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原理介紹Biacore是基于表面等離子共振(SPR)原理開發的新型生物分析傳感技術,進行實時,無標記互作分析。該技術的關鍵是利用基于SPR現象發展的生物傳感器作為檢測系統。一般情況下,當入射光以臨界角入射到兩種不同透明介質的界面時將產生全反射,且反射光強度在各個角度上都應相同。但若在介質表面上鍍一層金屬薄膜后,由于入射光可引起金屬中自由電子的共振,從而導致反射光在一定角度內大大減弱,其中使反射光*消失的角度稱作共振角(SPRAngel)。共振角會隨金屬薄膜表面通過的液相的折射...
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數字PCR突變檢測介紹數字PCR(digitalPCR,dPCR)通過將微量樣品進行微滴化處理,即稀釋和分液,直每個細分樣品中所含有的待測分子數一般不超過1(0或1)個,將含有核酸分子的反應體系分成成千上萬個納升級的微滴。再將所有微量樣品在相同條件下進行PCR擴增反應,使含有目標分子的微量樣品中的目標分子增加成千上萬倍,產生強的熒光信號,后對發生了擴增反應的微量樣品進行統計,有熒光信號的微滴判讀為1,沒有熒光信號的微滴判讀為0,根據泊松分布原理及陽性微滴的個數與比例即可得出靶...
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TaqMan探針法是針對DNA上的SNP位點設計PCR引物和TaqMan探針,進行實時熒光PCR擴增檢測的方法,通常用于少量SNP位點的分析,核酸定量分析以及腫瘤細胞突變分析等。探針的5’-端和3’-端分別標記一個熒光報告基團(Reporter,如FAM、VIC、HEX等)和一個熒光淬滅基團(Quencher,如TAMRA、BHQ1等)。當熒光探針保持完整時,5′-端報告基團經儀器光源激發的熒光正好被近距離的3′端熒光基團淬滅,儀器檢測不到5′端報告基團所激發的熒光信號。PC...
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SNaPshot基因分型技術是由美國ABI公司開發的一種基于熒光標記單堿基延伸鏈終止反應原理的分型技術,主要針對中小通量的SNP分型項目。簡單說來,在一個含有測序酶、四種熒光標記ddNTP、緊臨SNP位點5’-端的不同長度延伸引物和模板DNA的反應體系中,引物延伸一個堿基即終止,經ABI3730XL測序儀檢測后,根據峰的位置確定該延伸產物對應的SNP位點,而根據峰的顏色可得知摻入的堿基種類,從而確定該樣本的基因型。同時,通過多重PCR反應體系,可以同時檢測多種SNP位點,通常...
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